adevioktaviani_ngeblog: Uji Biuret dan Uji Xantoprotein

UJI BIURET

I. Tujuan :

Mengidentifikasi adanya protein dalam telur dengan preaksi biuret

II. Teori :

Protein (akar kata protos dari bahasa Yunani yang berarti "yang paling utama") adalah senyawa organik kompleks berbobot molekul tinggi yang merupakan polimer dari monomer-monomer asam amino yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan peptida. Molekul protein mengandung karbon, hidrogen, oksigen, nitrogen dan kadang kala sulfur serta fosfor. Protein berperan penting dalam struktur dan fungsi semua sel makhluk hidup dan virus.

Uji Biuret adalah uji umum untuk protein(ikatan peptida), tetapi tidak dapat menunjukkan asam amino bebas. Zat yang akan diselidiki mula-mula ditetesi larutan NaOH, kemudian ditetesi larutan tembaga(II)sulfat yang encer. Jika terbentuk warna ungu berarti zat itu mengandung protein.

Struktur protein ada 4 tingkatan yaitu :

a. Struktur primer menunjukkan jumlah, jenis dan urutan asam amino dalam molekul protein (rentetan asam amino dalam suatu molekul protein)

b. Struktur sekunder menunjukkan banyak sifat suatu protein, ditentukan oleh orientasi molekul sebagai suatu keseluruhan, bentuk suatu molekul protein (misalnya spiral) dan penataan ruang kerangkanya (ikatan hidrogen antara gugus N-H, salah satu residu asam amino dengan gugus karbonil C=O residu asam yang lain)

c. Struktur tersier menunjukkan keadaan kecenderungan polipeptida membentuk lipatan tali gabungan (interaksi lebih lanjut seperti terlipatnya kerangka untuk membentuk suatu bulatan)

d. Struktur kuartener menunjukkan derajat persekutuan unit-unit protein.

Ditinjau dari strukturnya, protein dapat dibagi dalam 2 golongan yaitu:

a. Protein sederhana yang merupakan protein yang hanya terdiri atas molekul-molekul asam amino

b. Protein gabungan yang merupakan protein yang terdiri atas protein dan gugus bukan protein. Gugus ini disebut gugus prostetik dan terdiri atas karbohidrat, lipid atau asam nukleat.

III. Alat /Bahan :

Ø Tabung reaksi

Ø Gelas ukur

Ø Pipet tetes

Ø Larutan putih telur (Albumin)

Ø Larutan NaOH 2M

Ø Larutan CuSO₄0,1M

IV. Langkah kerja:

1. Isi tabung reaksi dengan 2 ml putih telur.

2. Tambahkan 2 ml Larutan NaOH 2 m, kemudian kosok.

3. Tambahkan 10 tetes Larutan CuSO₄ 0,1 M. Amati perubahan yang terjadi.

V. Data Pengamatan

Reaksi	Hasil Reaksi
Putih telur	Tidak terjadi perubahan
Putih telur + NaOH	Menggumpal
Putih telur + NaOH + CuSO₄	Berwarna Ungu, menggumpal di bagian tengah

Pertanyaan :

1. Apa yang terjadi setelah penambahan NaOH? Mengapa?

2. Apa yang terjadi setelah penambahan CuSO₄? Bagaimana hal tersebut dapat terjadi ?

3. Mengapa lebih baik digunakan putih telur dari pada kuning telur dalam percobaan ini ?

Jika putih telur di ganti dengan kuning telur ramalkan yang terjadi !

4. Apa kesimpulan yang Anda peroleh dari percobaan ini ?

Jawaban :

1. Terjadi penggumpalan pada putih telur yang menandakan positif adanya protein.

2. Setelah penambahan CuSO₄terjadi penggumpalan pada bagian tengah dan warnanya menjadi ungu yang menandakan positif adanya protein pada putih telur. Hal itu bisa terjadi sebab CuSO₄mengandung unsur tembaga dan belerang dimana keduanya termasuk unsur yang banyak terdapat protein sehinggi putih telur berwarna ungu.

3. Karena di dalam putih telur terdapat banyak protein, putih telur terdiri atas rangkain asam amino yang disebut dengan protein. Sedangkan kuning telur mengandung lipoprotein, lipoprotein merupakan gabungan lipid dan protein.

Tidak terjadi penggumpalan pada kuning telur karena kuning telur bersifat pengemulsi.

4. Dari data di atas disimpulkan bahwa putih telur mengandung protein.

UJI XANTOPROTEIN

I. Tujuan :

Mengidentifikasikan adanya protein dalam putih telur dengan pereaksi xantoprotein

II. Teori :

Protein merupakan salah satu dari biomolekul raksasa selain polisakarida, lipid dan polinukleotida yang merupakan penyusun utama makhluk hidup. Protein adalah senyawa organik kompleks berbobot molekul tinggi yang merupakan polimer dari monomer-monomer asam amino yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan peptida. Molekul protein itu sendiri mengandung karbon, hidrogen, oksigen, nitroge dan kadang kala sulfur serta fosfor. Protein dirumuskan oleh Jons Jakob Berzelius pada tahun 1938.

Uji Xantoproteat adalah uji terhadap protein yang mengandung gugus fenil(cincin benzena). Apabila protein yang mengandung cincin benzena dipanaskan dengan asam nitrat pekat, maka akan terbentuk kuning yang kemudian menjadi warna jingga bila dibuat alkalis(basa) dengan larutan NaOH.

III. Alat dan Bahan :

Ø Tabung reaksi

Ø Gelas ukur

Ø Pipet tetes

Ø Lampu spiritus

Ø Penjepit tabung reaksi

Ø Larutan putih telur (Albumin)

Ø Larutan HNO₃ 2 M

Ø Larutan NaOH 2 M

IV. Langkah Kerja :

1. Isi tabung reaksi dengan 2 ml putih telur

2. Tambahkan 2 ml larutan HNO₃, kocok dan amati perubahannya

3. Panaskan dengan nyala api kecil kemudian dinginkan

V. Data Pengamatan :

Reaksi	Hasil Pengamatan
Albumin + HNO₃ (sebelum dipanaskan)	Menggumpal, berwarna putih
Albumin + HNO₃ (setelah dipanaskan)	Menggumpal, berwarna kuning
Albumin + HNO₃+ NaOH	Menggumpal, berwarna orange (Albumin + HNO₃ terpisah dari NaOH)

Pertanyaan :

1. Apa yang terjadi setelah albumin ditambah dengan asam nitrat sebelum dan setelah dipanaskan ?

2. Adakah pengaruh pemanasan dalam percobaan ini ? Jelaskan !

3. Apa fungsi NaOH dalam percobaan ?

4. Apa yang dapat Anda simpulkan dari percobaan ini ?

Jawaban :

1. Setelah ditambahkan, putih telur akan menggumpal dan berwarna putih (endapan putih). Hal ini terjadi karena proses nitrasi terhadap cincin-cincin benzena. Jika dipanaskan warna putih tersebau beribah menjadi kuning.

2. Ya. Pemanasan yang dilakukan akan membuat protein yang dikandung albumin mengalami denaturasi yang ditandain dengan adanya penggumpalan.

3. Sebagai katalisator

4. Pengujian ini memberikan hasil positif terhadap asam amino yang menggandung cincin benzena, seperti fenilalanin, tirosin dan triptofan. Asam nitrat pada putih telur akan menggumpal dan berwarna putih (endapan putih). Hal ini terjadi karena proses nitrasi terhadap cincin-cincin benzena. Jika dipanaskan warna putih tersebau beribah menjadi kuning.